なぜあなたはすべてのステップの後に井戸を洗う必要があったのですか？
洗浄手順が必要な理由は次のとおりです。
非結合物質の除去： 試薬または抗体を添加した後の洗浄手順は、過剰な抗体、非特異的結合分子、または固相に拘束または結合していない反応成分などの非結合物質を除去するのに役立ちます。これにより、検出信号が固有で、バックグラウンド干渉がないことが保証されます。
相互汚染の最小化： 洗浄ステップは、サンプル間の相互汚染のリスクを効果的に減らします。これは、複数のサンプルが同時に処理されている場合に特に重要です。これは、反応成分または汚染物質の井戸から別のものへの持ち込みを防ぐためです。洗浄は、個々のサンプル結果の完全性と精度を維持するのに役立ちます。
干渉物質の効率的な除去： 後続のステップを妨げる可能性のある物質を除去するには、洗浄が必要です。たとえば、ELISAアッセイでは、洗浄は非結合コンジュゲート抗体複合体を排除するのに役立ち、それにより背景色の発達を減らし、比色反応の特異性を高めます。 PCRでは、洗浄は以前の増幅サイクルからヌクレオチド、プライマー、およびポリメラーゼを除去し、キャリーオーバー汚染のリスクを最小限に抑え、次のサイクルで正確な増幅を確保します。
標準化と再現性： 標準化された洗浄手順に従うことにより、研究者は、実験全体および異なる研究所間で条件が一貫していることを保証します。この一貫性は、信頼できる再現性のある結果を得るために重要です。
洗浄手順には、洗浄バッファーを分配して吸引するために、マルチチャネルピペットまたは自動プレートワッシャーを使用することが含まれます。洗浄バッファーは、通常、アッセイで使用された元のバッファーの組成に似た緩衝塩生理食塩水溶液ですが、反応成分は含まれていません。
過洗浄せずに適切な洗浄が重要です。洗浄すると、固相に縛られた必須成分が失われ、アッセイの感度に影響を与える可能性があります。したがって、洗浄プロトコルは、不動分子または関心のある分析物の完全性を維持しながら、不要な物質を最適に除去するように慎重に設計されています。