ウエスタンブロット検出方法

HIVとAIDSの症例の数が世界中で増加したため、正確なHIV検査の必要性が不可欠になりました。現在、ELISA HIV検査が陽性の後、医療専門家はウエスタンブロット検査を使用してHIV感染症を確認しました。医師は、ウエスタンブロット検査を通じてライム病と診断されます。このテストでは、複雑な検出方法を利用しています。医療従事者は、検出プロセスを容易にするために、ゲルから膜に血液サンプルを移動する必要があります。膜内の抗体を実際に識別するために、労働者は特定の酵素、基質、および/または蛍光を使用します。

1. AP酵素

   • アルカリホスファターゼ（AP）は、ウエスタンブロット試験の主要な酵素の1つを構成します。 APには線形反応時間があり、他の酵素よりも検出の利点が得られます。 AP反応が発生する時間が長くなればなるほど、テストがより正確になります。ただし、長期間は他の化合物や「バックグラウンド」ノイズを拾うことができ、テストの結果を歪める可能性があります。

   HRP酵素

   • 医療従事者は、HRPのサイズが小さく、活動率が高いこと、反応膜との互換性、信頼性、安価な価格、広範囲にわたる可用性により、APよりも優れている西洋ワラディッシュペルオキシダーゼ（HRP）を考慮してください。

   発色基質

   • 医療専門家は、血液と酵素の内側膜反応を見るのに最適な発色基質を考慮しています。発色剤基質は他の基質ほど敏感ではなく、ブロットが乾くと消える傾向があります。しかし、視覚的な迅速なテストの確認のために、発色剤基質は効果的な選択をします。

   化学発光の吸い取り基板

   • 化学発光吸合基板は、テストを成功させるために一定の反応を必要とします。酵素が活性を停止するか、基質が枯渇すると、テスト結果が失われます。ただし、最適なテストでは、テスト結果は1〜24時間で利用可能になります。肉眼では、デジタルイメージング機器またはX線を使用して実際にテスト結果を確認します。これは、肉眼では検出できないためです。

   蛍光症

   • 医療従事者が酵素とそれぞれの基質で検査しない場合、フロフォア結合抗体を利用します。 Flurophoreテストでは、必要な手順が少なくなりますが、特別な機器が必要です。このテストでは、膜に適切な反応を引き起こす励起光源が必要です。蛍光団と照明機器は高価ですが、医療従事者は同じ実験で複数の蛍光を使用する利点があります。