顕微鏡で血球を観察する手順
必要なもの
- 顕微鏡
- 顕微鏡スライド
- アルコールまたは石鹸
- 滅菌済み血液採血用ランセットまたは針
- ウィルトン染色液(Wright染色液)を入れた染色皿
- 蒸留水を入れた染色皿
- ペーパータオル
- 浸透油(Immersion oil)
- 血球形態学の参考書
手順
指先をアルコールまたは石鹸で清潔にし、滅菌ランセット(または針)で指先を軽く刺す。血液の小滴をスライドの端に置き、別のスライドのエッジを30〜40度の角度で血滴に当て、血液をスライド全体に薄く伸ばしてスミア(薄膜)を作る。乾燥させる。
乾燥した血液スミアをウィルトン染色液に15秒間浸す。余分な染色液を軽く振って取り除き、蒸留水の皿に30秒間移す。その後流水で洗い流し、ペーパータオルで軽く拭き、自然乾燥させる。
乾燥した染色スミアに浸透油を一滴垂らす。スライドを顕微鏡のステージにセットし、クリップで固定する。光源を点灯し、コンデンサーと絞りダイヤフラムを調整して光量を最適化する。低倍率油浸対物レンズ(40×〜45×)で観察を開始する。
低倍率レンズを粗動調整ノブでスライド上の油滴に接触させ、微調整ノブで焦点を合わせる。赤血球は小さな赤みがかった二凹円盤として多数観察でき、白血球は赤血球より大きく数は少なく、紫色の核と青やピンクの細胞質を持つ。好中球、リンパ球、単球、好酸球、好塩基球が識別でき、血小板は紫色の小斑点として散在する。
低倍率で全体像を把握したら、高倍率油浸対物レンズ(95×〜100×)に切り替える。これにより細胞内小体、微生物、形態異常などを詳細に観察できる。焦点は微調整ノブで微調整し、必要に応じてコンデンサーを上げ、絞りダイヤフラムを開いて光量を増やす。
観察が終わったら低倍率レンズに戻し、スライドをステージから取り外す。レンズとステージから油分を完全に拭き取り、清掃する。
