抗体反応の評価方法（コムズ試験）
概要
抗体反応は、特定の抗原が抗体と接触したときに起こります。血液銀行での血液型判定や、緊急時の献血者選定に利用される抗原‑抗体反応検査（コムズ試験）は、血液と試薬を混合した際に凝集（凝集体）が認められるかで結果を評価します。
必要なもの
- 採血管（チューブ）
- 移動ピペット
- 光学凝集観察器
- 生理食塩水ボトル
- 遠心管
- 遠心機
- 抗体（または試料）
手順
- 適切な採血手技で新鮮な血液サンプルを採取する。
- 赤血球を洗浄し、3％懸濁液を作る。
- 移動ピペットで血液を1〜3滴、滅菌済み遠心管に入れる。
- 生理食塩水ボトルの先端を管の中心に向け、強制的に注入し、管の3/4まで満たす。
- キャップを閉め、遠心機で細胞を管底にボタン状に沈降させる。
- 遠心後、上清の食塩水をすべて除去する。底部の細胞ボタンを乱さないよう注意し、必要に応じて洗浄を繰り返す。
- 適切な抗体または検体を加える。
- 光学凝集観察器を使用し、管底が見やすいように位置を調整する。
- 管を手で軽く回転させて細胞を再懸濁し、凝集の有無を観察する。
- 以下の基準で反応を評価する。
評価基準
- 4+：固体状の大きな凝集体が1つ
- 3+：大きな凝集体が数個
- 2+：中程度の大きさの凝集体が複数、背景はクリア
- 1+：小さな凝集体が見られ、背景は濁りがある
- +w：微小な凝集体があり、背景が濁っている
- +micro：顕微鏡でのみ凝集体が確認できる
- MF（Mixed Field）：多くの凝集細胞の中に小さな凝集体が混在
- Hem（陽性）：溶血やヘムが認められた場合は陽性
- Neg（陰性）：反応が認められない場合は陰性