アルカリ溶解理論

科学者は、アルカリ溶解を使用して、遺伝子実験で使用するために細菌からプラスミドDNAを抽出します。プラスミドは、研究用の小さな遺伝コードを含むDNAの小さな円形分子です。

1. なぜアルカリ性溶解

   • アルカリ溶解プロトコルは、プラスミドDNAを含む細菌ペレットに追加された一連の溶液で構成されています。溶液のアルカリ度の増加により、細胞が破裂します。この抽出方法は、ゲノムDNAを破壊し、細胞タンパク質を変性させ、科学者に比較的純粋なサンプルを提供しながら、プラスミドDNAを保護します。

   SDSおよびNAOH

   • アルカリは、個々の細胞の溶解を引き起こすために使用される2つの主要な化学物質を説明しています。ドデシルナトリウム（Lauryl）硫酸（SDS）は、細胞膜に穴を開けることで細胞を不安定にした洗剤です。水酸化ナトリウム（NAOH）は細胞壁を分解し、細胞を崩壊させ、遺伝物質を溶液に放出します。

   プラスミドDNAが生き残る理由

   • アルカリ性溶解プロトコルにおけるNaOHの追加特性は、DNA塩基対間の水素結合を破壊することです。これにより、ゲノムDNAとプラスミドDNAが単一鎖に変性します。溶液に酢酸カリウムを添加すると、アルカリ性が中和され、小さなプラスミドDNAが溶液に再生成して溶解することができます。ゲノムDNAは大きすぎて、その全長を再生成できません。それと変性したタンパク質は、遠心分離中に沈殿し、プラスミドDNAを溶液中に残します。