DNA抽出手順
-
- <図>
図>
細胞溶解
-
溶解は、細胞が文字通り壊れている作用であり、その内容物が分析のために流出します。抽出するDNAサンプルを含む細胞を開く必要があるため、溶解物または内部の液体にアクセスできるようにする必要があります。これはいくつかの方法によって達成されますが、最も一般的なものは音響です。音響は、凝縮された音が細胞に適用され、それらを動揺させ、分子間反応を破壊するプロセスです。溶解を誘導する他の方法には、ウイルスの導入が含まれます。その表面を食べる酵素。浸透は、細胞を水に入れ、それらの内側の液体を外側に向けて抽出できるようにすることを含みます。
膜除去
-
次に、細胞の膜の周りの脂質を除去する必要があります。脂質は、脂肪、ワックス、モノグリセリド、リン脂質、および細胞膜の構造成分として使用されるその他の天然の分子物質の種類であり、ある程度の剛性を与えます。これらは、細胞の溶解物を洗剤溶液、通常はクロム酸の形式で洗浄することによって除去されます。
タンパク質除去
-
脂質が溶解物から正常に除去された後、残りのタンパク質を除去することが重要になりました。これは、プロテアーゼと呼ばれるものを追加することで達成されます。プロテアーゼは、与えられたタンパク質を分解するように設計された特別な酵素です。この作用はタンパク質溶解と呼ばれますが、プロテアーゼはアミノ酸を結合する結合の加水分解(分解)を引き起こします。アミノ酸はタンパク質を構成し、その構成がなければ、タンパク質は分解します。
沈殿
-
ついに純粋なDNAを見る時が来ました。これは、溶解物を氷冷アルコール、通常はエタノールに浸すことで行うことができます。 DNAはアルコールに不溶性であるため、一緒に凝集します。ミックスを金属スプーンで攪拌すると、DNAは白い綿に似た金属の周りに目に見えて包みます。これは沈殿と呼ばれ、DNAはDNA沈殿物として知られています。
イソプロパノール
-
エタノールとともに、イソプロパノールも時々使用されますDNA沈殿物を抽出します。正の面では、エタノールよりも効率的であり、使用するとDNAの濃度が高くなります。ただし、揮発性もはるかに低く、乾燥するのにもっと時間がかかります。また、イソプロパノールを使用すると、DNAがスプーンやチューブに付着しない可能性があることにも注意してください。
- <図>
