自宅でグラム染色スライドを作成する手順

概要

グラム染色は、細菌がグラム陽性かグラム陰性かを判別する顕微鏡検査です。結晶紫で染色した後、グラム陽性菌は紫色、グラム陰性菌はピンク色に変わります。形状や大きさ、数も観察でき、診断や治療の参考になります。自宅で正しくスライドを作成すれば、手技を練習できます。

サンプルを塗布：綿棒で口腔内を拭き、得られた液体をスライドに円を描くように薄く広げます。直径約2 cm 程度にし、自然乾燥させます。作業中は必ず手袋を着用してください。
結晶紫で染色：スライドに結晶紫染色液を滴下し、60秒間放置します。その後水で軽く洗い流し、再び自然乾燥させます。
ヨウ素で固定：ヨウ素液を滴下し、60秒待ってから水で洗い、乾燥させます。
脱色：脱色剤をスライド全体にかけ、5秒だけ放置したらすぐに水で洗い流し、乾かします。
サフラニンで二次染色：サフラニン染色液を滴下し、90〜120秒保持した後、水で洗い流し、乾燥させます。
余分な水分を除去：軽く叩くか、ティッシュで拭き取り、完全に乾かします。
観察：顕微鏡でスライドを観察し、菌の形状と色（紫＝グラム陽性、ピンク＝グラム陰性）を確認します。診断目的の場合は、専門の検査技師に評価してもらいましょう。