マイクロソーム調製プロトコル
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方法
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科学者はさまざまな方法を使用して開いた細胞を壊します:ソニケーター、凍結融解サイクル、ホモジナイザー、洗剤、およびより大きなサンプルのためにブレンダー。彼らは、このスラリーを遅い速度で遠心にして、より大きな断片、核と壊れていない細胞をペレットし、このペレットは廃棄されます。残りの懸濁液は、ミクロソームをペレットするために高速で遠心分離されます - これらは使用のためにバッファーに再懸濁されます。
考慮事項
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科学者は、開始する前に多くのポイントを考慮する必要があります。最初は細胞型です。たとえば、肝臓を灌流して汚染した血液を除去する必要があります。第二に、研究される分子には、安定性のために特定の温度が必要になる場合があります。第三に、ミクロソームは異なるサイズに分離できます。したがって、遠心速度は、目的の画分を取得するために重要です。
を使用します
- <図>
薬物代謝はミクロソームで研究できます。 図>研究者は、ミクロソームを使用して、異なる細胞タイプに対して特徴的な代謝経路を特定して定義します。ただし、肝臓は動物の代謝部位であるため、科学者 - 特に医薬品産業では、肝臓ミクロソームを使用して薬物代謝を調べます。
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