アクチン抗体とは何ですか?
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アクチン
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タンパク質アクチンは、藻類や菌菌から犬や人間まで、さまざまな生物全体で非常に厳密に、または「高く」保存されています。それは単一のタンパク質ユニット、またはモノマーとして存在します。モノマーは、より大きく球状タンパク質を形成するために結合する必要があります。細胞の動きと細胞内のオルガネラの動きのために、細胞内でフィラメントを作るためにアクチンが必要です。したがって、運動性や細胞分裂などの基本的な細胞プロセスには不可欠です。
アクチン抗体を使用した研究の領域
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アクチン抗体は、最も日常的かつ広く使用されている細胞生物学ツールの1つです。免疫組織化学、ウエスタンブロッティング、免疫沈降、ELISA、およびフローサイトメトリーを使用した実験への適用には、成功の長く、文書化された歴史があります。研究目的で抗体を産生および販売するほとんどの企業は、色付きまたは蛍光分子に関連する可能性のある一次抗体を生成します。
免疫組織化学および免疫細胞化学におけるアクチン抗体
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アクチンは、細胞のメッセンジャーリボ核生産の重要な成分であるため、通常、核内でかなりの量で存在します。ここでのその存在は、IHCまたはICC実験の陽性対照として使用できます。アクチンは、その成分アミノ酸を認識する抗体を使用して検出されます。アクチン抗体が検出されたという視覚的観察は、使用されたプロトコルが正しく実行または配合されたことを証明しています。アクチン抗体による染色は、研究または医療診断のために、他のタイプのタンパク質を検出するための他の抗体染色の陽性対照として機能します。
ウエスタンブロッティングのアクチン抗体
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ウエスタンブロッティングは、ゲル電気泳動、免疫ブロッティング、抗体ハイブリダイゼーションなどの科学的手順を使用したタンパク質検出と定量化の方法です。目的のタンパク質とアクチンタンパク質は、ゲルを介して電気泳動され、さまざまなサイズのタンパク質がサイズ勾配に沿って分離できるようにします。その後、個々のタンパク質は特別な膜に移され、そこで固定化されます。アクチン抗体は膜に適用され、固定化されたアクチンタンパク質を検出し、対象タンパク質の検出のための陽性対照としても機能します。通常、アクチンタンパク質の既知の質量が使用されるため、この数を目的のタンパク質の数と比較して、その量を決定することが可能です。
免疫沈降中のアクチン抗体
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繰り返しますが、アクチン抗体は非常に日常的に使用され、よく研究されているため、アクチンとその既知のサイズの特性に厳密に結合する独自の能力は、免疫沈降実験で陽性対照として搾取されています。細胞内で発生する相互作用は、細胞を溶解することによって研究することができます - その崩壊を促進し、結果として得られる溶解物を収集します。これは本質的に異なるタンパク質の「スープ」です。目的とアクチンのタンパク質に対して抗体を結合し、混合物をカラムに適用することにより、他の不要なタンパク質から抗体結合タンパク質と抗体結合アクチンを精製することが可能です。アクチン抗体によるアクチンタンパク質の検出は、免疫沈降手順が成功したことの証拠として機能します。
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