抗体を決定する方法
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必要なもの
- 血清サンプル
- elisaプレート
- テストされている抗体を共役させる抗原
- 酵素リンクされた抗体または二次抗体
- 酵素リンク色の色変更インジケーター
- ペーパータオル
- ゴーグル
手順
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- 1
既知の抗原をいくつかの井戸の表面に置きます。
50マイクロリットルのIgG液でそれぞれを覆います。 5分が経過するまで井戸を邪魔しないでください。水道水で井戸をすすぎます。すすぎプロセスを5回繰り返します。ペーパータオルでウェルをタップして乾かします。井戸を拭かないでください。
- 2
血清と呼ばれる体液のサンプルをプレートに追加します。これらの体液サンプルには、井戸に対するコンジュゲートと競合他社のソリューションが含まれている場合があります。これは、抗体が存在する場合に結合します。血清サンプルは、ステップ1で適用された抗原に結合するように希釈する必要があります。
- 3
カゼインなどのタンパク質をウェルに加えます。これにより、プレートに接着することをテストされていない他のタンパク質が妨げられます。
- 4
井戸の上に静かに注がれた水道水ですすいでプレートを洗います。次に、ペーパータオルでプレートの側面をタップして、余分な水を取り除きます。洗浄プロセスをさらに4回繰り返します。井戸を拭かないでください。井戸にテストされているものに一致する抗体を追加します。
- 5
井戸の上に静かに注がれた水道水ですすいでプレートを洗います。次に、ペーパータオルでプレートの側面をタップして、余分な水を取り除きます。井戸を拭かないでください。洗浄プロセスをさらに4回繰り返します。この洗浄プロセスは、井戸から結合していない抗原を除去します。ウェルには現在、テストされている抗体抗原複合体のみが含まれています。プレートを洗ってください。これにより、非結合抗体酵素コンジュゲートが除去されます。
- 6
抗抗体とも呼ばれる二次抗体をウェルに加えます。これらは検出抗体に固執します。二次抗体は、色の変化指標と、ステップ1でウェルに加えられた抗原に共役します。
。 - 7
井戸の上に静かに注がれた水道水ですすいでプレートを洗います。次に、ペーパータオルでプレートの側面をタップして、余分な水を取り除きます。井戸を拭かないでください。洗浄プロセスをさらに4回繰り返します。これにより、結合していない余分な酵素リンクされた抗体が除去されます。
- 8
酵素リンクされた色変更インジケーターをプレートに適用します。
これにより、色を変えるために抗体がテストされているウェルが生じます。
- 9
色の変化のためにプレートのウェルを観察します。これは、体液サンプルに抗体が存在することを示します。
- 1