GFPトランスフェクションの手順と活用例

緑色蛍光タンパク質（GFP）の利用は、分子・細胞生物学に革命をもたらしました。研究者は細胞やタンパク質をかつてない方法で可視化できるようになり、その影響は大きく、2008年には蛍光イソギンチャクからGFPを発見・単離した下村昌弘がノーベル化学賞を受賞しました。

定義

• 遺伝子は、特定のタンパク質を産生するためのDNA配列です。プラスミドは、目的遺伝子（例：GFP）を含む独立したDNA分子で、実験用ベクターとして利用されます。トランスフェクションは、プラスミドを細胞内に導入する手法です。

方法

• トランスフェクションは、GFP遺伝子を含むDNAプラスミドを脂質や塩類と混合し、細胞に添加することで行います。混合液が細胞膜に一時的な孔を作り、プラスミドが細胞内に取り込まれ、遺伝子がタンパク質として発現します。市販のトランスフェクションキットを使用するか、試薬を自前で調製します。使用する細胞株やプラスミドの性質に応じて手法を選択します。発現したGFPは蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーで観察できます。

用途

• GFPは目的タンパク質に融合させてトランスフェクションし、細胞内での局在や動態をリアルタイムで追跡します。ノーベル委員会は、アルツハイマー病における神経細胞損傷の追跡や、胎児発生過程での膵臓β細胞の形成過程の可視化を代表的な応用例として挙げました。