GFPのトランスフェクションのプロトコル

緑色の蛍光タンパク質の使用は、分子および細胞生物学に革新されました。研究者は、これまでにない方法で細胞とタンパク質を視覚化することができました。科学的研究への影響は非常に深いため、2008年に蛍光クラゲからのGFPの発見と分離のために、オサム・シモムラが化学のノーベル賞を受賞しました。

1. 定義

   • 遺伝子は、特定のタンパク質の産生の原因となる細胞におけるデオキシリボヌクレイン酸の配列です。プラスミドは、GFPなどの関心のある遺伝子を含む別のDNAです。トランスフェクションは、細胞にプラスミドを導入する方法です。

   方法

   • トランスフェクションは通常、GFPなどの遺伝子を含むDNAプラスミドを脂質または塩と混合することを伴います。細胞はこの溶液にさらされ、細胞膜に穴が作成され、プラスミドがタンパク質として発現できる細胞にプラスミドを可能にします。商用トランスフェクションキットが利用可能であるか、試薬を実験室で作成できます。トランスフェクション法の選択は、使用されている細胞とプラスミドのタイプに依存します。 GFPは視覚化され、蛍光を検出する機器で監視されます。

   を使用します

   • GFPは通常、トランスフェクションのために目的のタンパク質に付着します。ノーベル委員会は、例として「アルツハイマー病中の神経細胞損傷」と「成長する胚の膵臓にインスリン生産ベータ細胞がどのように作られるか」の追跡を選び出しました。