HPLCテクニック

HPLCは、分析ラボで使用される標準的な定性的および定量分析手順である高性能液体クロマトグラフィーの略です。 HPLCは信頼性が高く繰り返し可能であるため、化学成分と生物学的成分の両方の複雑な混合物から分子を分離、識別、定量化するための好ましい技術になります。

1. 4つのコンポーネント

   • HPLC技術には、4つの主要なコンポーネントが含まれています。まず、極性が分子を分離するシステムの能力に影響を与えるため、カラムを介してサンプルを運ぶ溶媒送達システム（移動相）が重要です。クロマトグラフィー列は通常、吸着剤で満たされた垂直ガラス柱です。第二に、吸着剤（動いていないため、固定相とも呼ばれます）は、一般的にシリカゲルまたはアルミナです。第三に、サンプル導入システムは、溶媒送達システムに分析されるサンプルを導入するための何らかの注入ポートで構成されています。 4番目のコンポーネントは検出器です。

   検出器

   • 使用される検出器のタイプは、技術者が実行しているサンプルのタイプと、分離しようとしている分子に依存します。検出器を選択する際に技術者が使用する基準には、選択性、信号対雑音比、検出限界、線形範囲、時定数、ドリフト、細胞体積が含まれます。一般的に使用される検出器には、紫外線検出器、質量分析計、屈折率、蛍光検出器、または蒸発性光散乱装置が含まれます。

   手順

   • 検出器をオンにします。ポンプ（ポンプ（移動相を固定相）に移動するための圧力を追加するために使用されます）、およびクロマトグラムを記録および印刷するコンピューター。目的のデータを収集するために、適切なプログラムを選択してください。サンプルを注入ポートに注入します。プレッシャーに目を光らせてください。各タイプの列には最大圧力があります。これを超えないでください、または分離が発生しません。クロマトグラムを印刷して、結果を分析します。各実行の終了時に、詰まりを防ぐために注入ポートを洗い流すことが重要です。これにより、閉塞が生じる可能性があります。

   タイプ

   • 親水性相互作用クロマトグラフィーは、結合した極性の定常期と非極性の水検出可能な移動相を使用して、極性に基づいて分子を分離します。この手法は、単一のクロマトグラムで酸性、塩基性、中性サンプルを分離する能力を持っています。
     正常相クロマトグラフィーは、極性の固定相と非極性、非水性移動相を使用して、構造異性体（異なる方法でアトムが結合した同じ分子式の分子）を分離します。非極性静止相とやや極性移動相を使用します。この方法は一般に、製薬会社が放出前に薬物を修飾するために使用しています。

   を使用します

   • HPLCは、さまざまなアプリケーションで役立ちます。医薬品を分析するために使用できます。これは、既存の医薬品を浄化するだけでなく、新しい医薬品の研究に役立ちます。また、生物液、農薬、爆発物、その他の材料を分析するためにも使用されます。生物医学、生化学的、製薬研究に人気のある手法ですが、化粧品、食品、環境、エネルギー産業にも使用されています。