ゲノムでレート非対称性を実行する方法
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必要なもの
- ヒト線維芽細胞細胞株
- メンテナンス媒体
- ガンマとUV放射源
- 遠心分離機
- インキュベーター
- リン酸緩衝生理食塩水
手順
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5%の二酸化炭素を含むインキュベーターチャンバーの華氏37度で、チミジン、ペニシリン、グルタミン、胎児のウシ血清などの化学物質を含む培地でヒト線維芽細胞株をインキュベートします。
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細胞株をガンマと紫外線を伴う光源に30分間曝露します。細胞株をインキュベーターに18〜24時間置きます。
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新鮮な成長培地で細胞培養の懸濁液を作り、インキュベーターで1〜2時間再びインキュベートします。
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アルカリスクロース沈降方法を使用して、DNAの安定性と構造を研究します。細胞を20容量のリン酸緩衝生理食塩水で希釈し、4分間の角度で1分あたり1,000回転で遠心分離します。溶液を水酸化ナトリウムと塩化ナトリウムと混合し、変化のDNA成長相と構造を特定します。
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