TMREプロトコル

テトラメチルルホダミンエチル（TMRE）は、Mitopt™TMRE/TMRMミトコンドリア潜在評価キットで使用される「ゆっくり、親油性、カチオン性蛍光再分布染料」です。このプロセスは、細胞の膜貫通電位勾配を見るのに役立ちます。

1. アッセイの準備

   • プロトコルは簡単に従うことができ、摂氏37度で約20分かかります。アッセイで使用される生細胞は、使用の準備に数時間から数日かかる場合があります。対照細胞は、アポトーシスを受けるために誘導する必要があるため、準備に数時間かかる場合があります。

   プロトコルパート1

   • 特定の誘導プロトコルによると、アポトーシスまたは酸化ストレス誘導に最適な密度への培養細胞は、10（6）細胞/mlを超えない

   プロトコルパート2

   • 同時に、培養されていない非誘導陰性対照細胞集団（誘導集団と同じ密度で。

   プロトコルパート3

   • 希望するプロトコルに従って、アポトーシスを誘導するか、ミトコンドリアを意図的に脱分極します。

   プロトコルパート4

   • 1xアッセイ/洗浄バッファーを準備します。

   プロトコルパート5〜8

   • 1 mmまたは0.2 mm Mitopt™TMRE/TMRMストックを準備します。プロトコルパート6の場合、1 mmの1：100希釈、または細胞培養サンプルにスパイクするための0.2 mm Mitopt™TMRE/TMRM溶液の1:20希釈を準備します。

     プロトコルパート7の場合、MITOPT™TMRE/TMRM溶液の最終20〜200 nm濃度を使用した染色細胞。

     プロトコルパート8の場合、データを分析します。