LB寒天プレートの作り方

寒天はゼラチン性物質で、赤い藻類から製造され、さまざまな目的に使用されます。その一般的な用途の1つは、細菌の培養媒体としてです。 LB寒天は、リソゲンブロス（LB）と組み合わされた栄養寒天です。 LBがLuria-Bertaniの略であるのは、一般的に誤りです。しかし、その発明者であるジュゼッペ・ベルタニは、彼の論文で「20世紀半ばのリソゲン：P1、P2、およびその他の実験システム」で、イニシャルは常に彼の名前ではなく、彼のコアソーバー、サルバドール・ルリアの名前ではなく、溶解性スープを表すことを意図していたと述べています。 LB Agarは多用途で、かなり簡単です。

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必要なもの

• 完成媒体の1 Lの場合：
• スケールと計量論文またはトレイ
• 1-lグラデーションシリンダー
• 1 l蒸留または脱イオン水
• 2-l erlenmeyer flask
• 10 gトリプトン
• 5 g酵母抽出物
• 5 g非ヨーロッ化テーブルソルト
• 15 g agar
• アルミホイル
• 防水オーブンミット
• オートクレーブまたは圧力鍋
• 滅菌ペトリプレート

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手順

1. • 1 <図>
     準備しようとする媒体の2倍のボリュームを保持するerlenmeyerフラスコを使用します。

     トリプトン、酵母抽出物、塩をエルレンマイヤーフラスコに入れます。

   • 2 <図>
     滅菌時のオートクレーブまたは圧力鍋の圧力に細心の注意を払ってください。

     蒸留水または脱イオン水を加えてサーまたはシェイクして、ほとんどの乾燥成分を溶解します。

   • 3

     寒天を加えて、揺れたり、かき混ぜ続けたりします。すべての寒天は溶解しませんが、そのほとんどをソリューションに入れることが重要です。フラスコの底に沈殿していない、溶解していない寒天の大きな塊を避けてください。

   • 4

     フラスコの開口部をホイルで密封します。

   • 5

     フラスコをオートクレーブセーフ容器に入れます。

   • 6

     容器に約1 cmの水を注ぎます。

   • 7

     容器とフラスコをオートクレーブに入れます。オートクレーブを液体サイクルに設定し、少なくとも20分間滅菌します。滅菌のために圧力鍋を使用している場合は、ステップ8に進みます。それ以外の場合は、ステップ10にスキップします。

   • 8

     圧力鍋を使用している場合は、炊飯器に少量の水を置き、フラスコを水に入れます。この方法を使用して、一度に250ml以上を一度に滅菌しようとしないでください。

   • 9

     圧力鍋を約20 psiに持って行き、約30分間滅菌します。

   • 10

     フラスコがかなり熱くなるので、オートクレーブまたは圧力鍋からフラスコを取り外します。

   • 11

     滅菌が完了すると、フラスコを静かに渦巻かせます。これにより、ソリューション全体に寒天をより均等に分配します。

   • 12

     フラスコを適切な表面に置き、少し冷まします。 1 L以上の培地を準備している場合は、10〜20分ごとに穏やかな渦巻きを与えます。指の後ろをフラスコに逆らって約2秒間保持しても、触るのが不快になることなく、媒体が十分に冷却されていることを知ることができます。これを試みる前に約15〜20分待ってください。

   • 13

     平らな表面にペトリ皿を置きます。皿のほとんどが覆われたままになるように、斜めに蓋をそっと持ち上げます。蓋をプレートからまっすぐ持ち上げないでください。

   • 14

     皿が約半分になるまで、フラスコからペトリ皿に媒体を注ぎます。

   • 15

     すぐに蓋を交換し、プレートを脇に移動し、必要なプレートがすべて満たされるまで次のプレートに移動します。プレートは約30分で固化を完了します。

   • 16

     すぐに接種していない場合は、到着した滅菌袋または別の適切な滅菌容器にペトリ皿を置きます。容器を密封して水分を保存します。必要に応じてプレートにラベルを付けます。プレートを保管している場合、それらは約39〜40度f。

     の温度に保持する必要があります。