フローサイトメトリーデータを分析する方法

フローサイトメトリーは、光散乱と光励起の理論を使用して、細胞と粒子を分析およびカウントするプロセスです。細胞は、一度に1つずつシースを強制され、レーザーのビームを通過します。レーザーは細胞内の化学物質を励起します。さまざまな種類のセルは、異なるタイプの光を放出します。光学検出器またはレンズは、光を拾って測定し、光をデータストリームに移します。データを分析することにより、技術者は細胞の分布を把握し、医師と研究者が治療に関して決定を下すのに役立ちます。

手順

1. • 1

     サイトメーターのパラメーターを設定します。すべてのサイトメーターには、セルから放出された光を受け入れ、光の量と品質をアクセス可能なデータに変換するコンピューターコンポーネントがあります。 Because there are different types of cells, there is a large amount of data created.必要なデータのパラメーターを設定すると、情報の流れが管理可能なレベルまで遅くなります。いくつかのオプションには、電圧レベルの設定、レーザーパルスパラメーターの調整、光のしきい値の設定などがあります。

   • 2

     各光レンズのフィルターを選択します。各レンズの特定の帯域幅を切り取るフィルターにより、サイトメーターは各セルの異なる化学特性を認識できます。また、サイトメーターは、前方の散乱（FS）として光がまっすぐに反射されるかどうか、または副散乱（ss。）

     で90度の角度で反射されるかどうかを認識できます。
   • 3

     対数取得または線形の取得を選択します。線形獲得は、サイトメーターによって生成される生データです。細胞の種類、またはレーザービームを通る細胞の化学的構成を示しています。対数関数はさらに一歩進んでいます。数学的関数を使用して、サイトメーターによって検出できない可能性のある追加の細胞を投影します。たとえば、細胞はウイルス感染の副産物である化合物を示す場合があります。ウイルスが軽い流れによって検出されないほど小さすぎるかもしれませんが、対数関数は、細胞の化学的構成に基づいてウイルスの存在を仮定します。

   • 4

     1つまたは2つのパラメーターヒストグラムを選択します。これらは、サイトメーターによって収集されたデータを表示するために使用されるグラフのタイプです。データがすべて「正の」軸にプロットされている場合、1つのパラメーターヒストグラムが適切です。つまり、すべての光が反射および測定されることを意味します。これを簡単に考える方法は、フレームの左と下部にレベルがある棒グラフを想像することです。これらの2つのパラメーターの間に情報がプロットされます。しかし、さまざまな量の光を吸収するセルの場合、2つのパラメーターヒストグラムが使用されます。これにより、データを正軸と負の両方の軸の両方にプロットできます。