放射線ハイブリッドとは何か

放射線ハイブリッドマッピング

放射線ハイブリッドマッピングは、哺乳類染色体の長距離マップ作成や遺伝マーカーの相対位置を特定するために開発された遺伝子工学手法です。DNAマーカー間の距離と順序を統計モデルで測定し、物理的な遺伝マップを構築します。この手法は、ヒト疾患遺伝子の位置特定に不可欠です。

放射線ハイブリッド技術の手順

1. DNAの増幅と精製を行い、シーケンスプロジェクトと同様の準備を行う。
2. 放射線（主にX線）でDNAを断片化し、これらの断片をハイブリッド細胞に導入する。
3. ハイブリッド細胞を大量培養し、PCR と連鎖解析でマーカー間の距離を測定する。近接したマーカーほど放射線で分離されにくく、保有率が高くなる。

手法・手順の詳細

二つの細胞系統（どちらも毒性培地で生存できない）が用いられ、片方は放射線で染色体が破断され、破片がもう一方の細胞と融合してハイブリッドを形成します。ハイブリッドは両系統から耐性遺伝子を取得し、毒性培地で生存できるようになります。

培養

生存したハイブリッド細胞を大量に培養し、放射線で破壊された細胞系統由来のDNAを増幅します。その後、特定の遺伝マーカーをPCRで増幅し、ゲル電気泳動で組み込まれたかを確認します。各クローンでのマーカー保持頻度は統計的に解析されます。

応用例

ヒト、ラット、マウスなど複数種の染色体マップ作成に利用され、多因子疾患の研究に高精度なマップを提供します。また、ヒト新規cDNA全長配列26本の染色体位置決定などにも活用されています。