ゲル電気泳動で染料を追跡する機能は何ですか?
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重要性
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DNAの断片を分離するために、サイズを測定する目的で、特定の断片を分離するために、科学者は電流が充電された溶液に水没したアガロースゲルにDNAを入れました。電流はゲルを介してDNAフラグメントを押し、ゲルが多孔質であるため、より迅速に小さなDNAフラグメントがワームになります。彼らは同じ時間で大きな断片よりも遠く移動します。
目的
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DNAは、試験管内の溶液中の場合は無色です。試験管とゲルの両方で、サンプルを見やすくするために、サンプルに色付きの追跡染料を追加します。染料はDNAにまったく影響しません。
追跡
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通常の追跡染料は、50%グリセロール溶液中のブロモフェノールブルーです。ブロモフェノールブルーは、サンプルを明るい青色に色付けするため、ゲルを通る進行を簡単に追跡できます。追跡染料がゲルの長さの約3/4を移動したとき、電流をオフにする時が来ました。
密度
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トラッキング染料は、グリセロールの濃度が高いため、濃いです。これにより、DNAサンプルは、電流を運ぶゲルの上の溶液に浮かぶのではなく、ゲルの荷重スロットに沈みます。
染料の移動
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ブロモフェノールブルーは、300塩基対を含むDNA鎖とほぼ同じ速度でアガロース溶液を介して移動します。より大きなDNA鎖の進行を追跡する場合は、キシレンシアノールで追跡染料を使用できます。これは、4,000塩基対のDNA鎖とほぼ同じ速度で移動します。
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