トリプシン実験で溶液ミルクがいつ透明になるかを判断するより良い方法は何ですか？
分光光度計を使用して、トリプシン実験のエンドポイントを決定するための改善された手順を次に示します。
材料：
- トリプシン溶液
- カゼイン基質溶液
- 水酸化ナトリウム（NAOH）溶液（0.1 M）
- 分光光度計
- キュベット
手順：
1。反応混合物を準備：
- キュベットでは、特定の量のカゼイン基質溶液（1 mLなど）と適切な体積のトリプシン溶液（0.1 mLなど）を混ぜます。
- 適切な温度（37°Cなど）で混合物を希望する時間（例：数分）でインキュベートします。
2。反応を停止：
- 特定の時間間隔（毎分）で、少量の反応混合物（0.1 mLなど）を引き出し、別のキュベットに移します。
- 反応を止めるために、十分な量の水酸化ナトリウム溶液（1 mL）をすぐに追加します。
3。測定吸光度：
- 分光光度計を使用して、特定の波長（440 nmなど）で停止した各反応混合物の吸光度を測定します。
4。吸光度をプロットします：
- 時間（x軸）と吸光度（y軸）でグラフをプロットします。
5。エンドポイントを決定します：
- 時間の経過とともに吸光度値を分析します。エンドポイントは、吸光度がプラトーに達するか、有意な減少を示す時点であり、カゼインの広範な加水分解を示しています。
この方法は、カゼイン加水分解中の小さなペプチドとアミノ酸の放出により吸光度の変化を測定することに依存するため、溶液の除去を視覚的に観察することと比較して、より客観的かつ定量的なエンドポイントの決定を提供します。