結核グラム染色の説明
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生理学
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Mycobacterium結核は、棒状の（bacilli）、非運動性、非植え付け、義務的な航空です。長さ0.4x3マイクロメートルを測定します。 結核菌は、15〜24時間ごとにバイナリ核分裂（生殖細胞分裂）を受けますが、他の細菌と比較して遅いです。このため、Mycobacteriumは培地に登場するのに最大9週間かかることがあります。
結核菌は、紫外線と熱（低温殺菌）に敏感ですが、化学消毒剤に耐性があります。
グラム染色
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結核菌は、グラム陽性またはグラム陰性に分類することはできません。 グラム分類は、細菌の細胞壁におけるペプチドグリカンの量に基づいています。 グラム陽性細菌には厚いペプチドグリカン層（約90％）があり、グラム陰性細菌には薄いペプチドグリカン層（5〜20％）があります。 グラム染料は細胞壁に浸透し、細胞壁の化学成分と結合します。染色された細菌は顕微鏡下で紫またはピンクに見えます。
Mycobacterium tuberculosisでは、細胞壁はペプチドグリカンだけでなく、グラム色素の浸透を阻害する複雑な脂質で構成されています。細胞壁はまた、酸またはアルコールによる脱色に抵抗するため、マイコバクテリウムは「酸性」と呼ばれます。 細胞壁の脂質は、マイコール酸、コード因子、ワックスDです。細菌が染色されると、細菌細胞は非常に少ない色で弱いグラム陽性または淡いように見えます。
細菌を視覚化するには、オーマリン染色やZhiel-Neelson染色などの特別な染色を実行する必要があります。
オーラミン - リホダミン染色
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オーラミン - ロダミンプロセスは、黄色の蛍光色素を使用して、蛍光顕微鏡下で結核菌を視覚化します。過マンガン酸カリウムまたはアクリジンオレンジは、対比染色として使用できます。レンズの下では、細菌細胞が緑色に見えます。
オーラミン - ロダミン染色は、Zhiel-Neelsonよりも敏感で、費用対効果が高くなります。
Ziehl-Neelson Stain
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Ziehl-Neelson染色は、科学者のFranz ZiehlとFriedrich Neelsenから生まれました。 加熱されたカーボルフッシン、高濃度の酸アルコール、およびマラカイトグリーンやメチレンブルーなどの対比染色を使用します。 蛍光顕微鏡の下では、細菌細胞は明るいピンクに見えます。
Ziehl-Neelsonは、結核菌とMycobacterium Lepraeの一次識別のゴールドスタンダードです。
寒天
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顕微鏡の識別に続いて、マイコバクテリウム結核は特別な培養寒天で栽培する必要があります。 Lowenstein-Jensen Agarには、複雑な有機物質（卵、ジャガイモなど）、塩、グリセロール、マラカイト緑（他の細菌が阻害されます）があります。汚染細菌をさらに阻害するために、抗生物質を添加することができます。 標本はこの寒天に置かれ、細菌は3〜9週間で成長します。
アルブミンやビオチンなどの栄養素の培養溶液を使用して、標的細菌の最小量でも成長をサポートできます。これは、Middlebrook 7H9（または7H12）培地として知られています。
コロニーは、両方に小さく、磨かれた明るい茶色のコロニーとして現れます。
高度な技術により、Mycobacterium Tuberculosisは、自動読者を使用して栽培できるようになりました。 Middlebrook 7H9培地と蛍光インジケーター化合物の液体溶液を使用して、成長を監視し、陽性または陰性の感染を報告します。
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