抗真菌剤感受性テストの方法

抗真菌剤（殺菌剤）は、真菌を殺すために使用される化学化合物または生物学的エージェントです。作物の病害防止や皮膚真菌感染症の治療に欠かせません。市場には多種多様な抗真菌剤が出回っているため、各製剤の感受性（感度）を正確に評価することが重要です。

抗真菌剤感受性のテスト

感受性テストは、特定の抗真菌剤が対象真菌に対して有効かどうかを判断します。耐性が生じると、作物被害やヒトの感染症が拡大します。代表的なテスト法は以下の3つです。

• ディスクアガー勾配法（ディスク拡散法）
• Eテスト法
• ブロスマイクロ希釈法（抗菌薬耐性評価に主に使用）

各テスト法の手順

ディスク拡散法（フルコナゾール対象）

• グルコースアガー培地を3枚用意し、溶解後に平板に注ぎ固める。
• 対象真菌を生理食塩水5 mLに懸濁し、綿棒で培地表面を90°ごとに4方向にストリークする。
• 培地を35 ℃で乾燥させ、24〜48時間培養する。
• フルコナゾール含有ディスクを培地上に置き、拡散円の直径を測定して感受性を評価する。

Eテスト法

• ディスク法と同様に培地を作成し、真菌を均一に塗布する。
• 滅菌したピンセットでEテストストリップ（抗真菌剤濃度勾配付き）を培地上に貼り付け、エージェントがアガーに接触するように配置する。
• 培養後、ストリップ上の抑制楔（エッジ）位置から最小発育阻止濃度（MIC）を読み取る。

ブロスマイクロ希釈法

• 液体培地を96ウェルプレートに分注し、抗真菌剤を階層的に希釈する。
• 各ウェルに一定量の真菌懸濁液を添加し、一定時間培養する。
• 濁度や肉眼での増殖を確認し、最小抑制濃度（MIC）を決定する。
• この方法は主に抗菌薬耐性評価に用いられ、抗真菌剤の感受性評価にはあまり使用されない。

テスト法の選択ポイント

各手法には以下のような利点と欠点があります。

• ディスク拡散法：フルコナゾールなど特定薬剤に対して信頼性が高く、コストも低い。
• Eテスト法：操作が簡単で幅広い真菌種（例：Candida）に適用可能だが、費用が高く、フルコナゾール感受性の正確な評価には限定的。
• ブロスマイクロ希釈法：定量的なMIC測定が可能だが、手間と装置が必要で、抗真菌剤の感受性評価には一般的でない。

目的や予算、対象真菌種に合わせて最適な方法を選択してください。