酵素アッセイからの活性化エネルギーを決定する方法

酵素は、化学反応の速度を劇的に増加させる有機触媒です。酵素の援助がなければ、ほとんどの代謝反応は、生物には単に遅すぎます。酵素は、活性化エネルギーを低く、反応を初期化するのに必要なエネルギーの量です。反応速度は、基質、反応する分子、または生成物が時間の経過とともに特定の温度に対して測定されるアッセイによって決定されます。異なる温度での反応速度を決定すると、活性化エネルギー（EA）を計算するために必要なデータが提供されます。 Arrhenius方程式ln k =-ea/rt + ln aを使用して、活性化エネルギーを決定できます。

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必要なもの

• 酵素アッセイデータ
• グラフペーパー
• 自然ログ機能を備えた電卓
• 温度計

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手順

1. • 1

     表形式の酵素アッセイからのデータを定式化します。データのプロットは、温度が上昇するにつれてレートが指数関数的に増加し、反応により多くの熱エネルギーを供給することを示します。測定可能な単位、基質の減少、または製品の増加は、（モル/リットル）/時間として記録されます。

     。
   • 2

     ケルビンの度で各温度（t）を計算します。酵素アッセイデータは、一般に摂氏スケールを使用して測定されます。 Arrhenius方程式を使用するには、Tの値はケルビンの度合いです。変換式はc + 273 =degrees k。

     です
   • 3

     各実験温度の反応速度の自然対数（LN）を決定します。この関数は、番号を入力してLNキーを押すことにより、自然ログ機能を備えた電卓を使用して実行できます。二次関数として自然ログを備えた計算機では、2番目の関数キー、LN、および数値を押す必要がある場合があります。

   • 4

     ケルビン度（x軸）の1/tに対して、反応速度（y軸）の自然なログ値をプロットします。温度に対する反応速度の変化は指数関数的です。ナチュラルログは、反応速度値を線形プロットに変換します。

   • 5

     y =mx+bの線の勾配切片方程式を決定します。 方程式は、ln k =- （ea/r）t + ln a、arrhenius方程式の形式で記述されると同等です。ラインの勾配は、ガス定数（R）上の活性化エネルギー（EA）の負の商を表します。ガス定数の指定された値は8.314472ジュールモール＃-1 kelvin＃-1に等しくなります。ここで、＃は指数を表します。

   • 6

     勾配（m）にガス定数（r）を掛けて、値EAを見つけることにより、活性化エネルギーを計算します。勾配の値はEAの負の値を表し、活性化エネルギーは絶対値または正の値として記録する必要があることに注意してください。