MBP精製プロトコル
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MBP融合タンパク質精製
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このプロトコル中、技術者は、オンラインでのプロトコルによると、PH 7.4、塩化ナトリウム、メルカプトエタノール（ME）およびエチレンジアミンティア酢酸（EDTA）のATRIS溶液で20 mLのポリマーアミロース樹脂を洗浄します。細胞サンプルを加え、遠心分離し、ゲル電気泳動で分析します。サンプルはクロマトグラファーでも分析されます。ここでは、技術者はクロマトグラフィー列を通過しながらソリューションの構成要素を排出または観察します。
小規模MBP融合タンパク質精製
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エルサレムのヘブライ大学によると、生物学者は試薬イソプロピルB-D-1-チオガラクトピラノシド（IPTG）を使用し、華氏39.2度で毎分8,000回転で10分間細胞培養をスピンします。その後、上清液を除去し、コールドPBSバッファーをサンプルに混ぜます。これはいくつかのチューブに分割され、再び遠心分離されます。その後、サンプルは後方分析のために-112度華氏に保たれます。
マルトース結合タンパク質融合タグ精製
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アフィニティタグは、タンパク質を検出および精製するために分子生物学で使用される遺伝子操作された分子です。このプロトコルは、ポリヒスチジンタンパク質マーカー（HISMBP）の構築を含む3つの段階に分割された複雑な一連の手順です。タンパク質の溶解度を評価するパイロット実験。 Nature Protocolsによると、MBP分子の大規模な精製。 E.COLIサンプルとは別に、技術者はアンピシリン、カナマイシン、IPTG、アニヒドロテトラサイクリン、グルコース一水和物、細胞溶解緩衝液、DNAポリメラーゼ、PCRプライマー、トリスアセテート - EDTAおよび臭素エチジウムを使用します。
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