必須フローサイトメトリー法

フローサイトメトリーには、レーザーなどの軽い励起源を使用して、個々の粒子の物理的特性を測定および分析するための流体力学的焦点焦点の原理が含まれます。フローサイトメトリーは主に細胞分析に適用され、分析された特性には細胞サイズ、粒度、蛍光強度が含まれます。フローサイトメトリーで使用される必須の検出方法には、前方散乱光、側面散乱光、蛍光が含まれます。

1. フローサイトメーター

   • フローサイトメーターは、流体、光学系、電子システムで構成されています。 Fluidicsシステムは、尋問のためにサンプルストリームをレーザービームに輸送する責任があります。光学システムには、サンプルを照らし、関連する検出器に直接光信号を照らすレーザーと光学フィルターが含まれています。この検出された光は、コンピューターによる解釈のために、電子システムによって電子信号に変換されます。

   前方散乱光

   • 前方方向に散乱する回折光は、前方散乱チャネル（FSC）と呼ばれるフォトダイオードによって、レーザービームから約20度の軸を検出されます。順方向の光は、粒子の表面積に直接比例し、細胞サイズの指標として使用され、生細胞と死んだ細胞を区別します。これらの特性により、FSCは信号処理のトリガーとして免疫表現型に適用されます。

   側散乱光

   • 側散乱光は、サイドスカーチャネル（SSC）によってレーザービーム軸から約90度で測定され、ビームスプリッターによって関連する検出器にリダイレクトされた、任意のセルラー界面で屈折した光を指します。側散乱光は、細胞の粒度または内部の複雑さとほぼ同等であり、細胞の粒状含有量を決定するために使用されます。側面と前方散乱光は、異なる細胞タイプを区別するために組み合わせて使用されます。

   蛍光

   • 蛍光は、蛍光色素ラベルを使用し、異なる波長で測定することにより、サイトカインやDNAなどの細胞内分子、細胞表面受容体に関する定量的および定性的情報の両方を提供します。各フルオロクロムラベルには、吸収スペクトルと呼ばれる光が吸収される特定の波長が鳴ります。光の光子としての蛍光機能は、光吸収後の励起電子によって放出されます。