デンプン消化実験の概要と手順
目的
酵素によるデンプンの分解過程を観察し、時間経過とともにデンプンの有無や生成されたブドウ糖の量を確認すること。
材料
- 試験管 2 本
- 37℃ に設定した水浴または加温ブロック
- 希釈ヨウ素液
- ベネディクト液
- 1% デンプン溶液
- 唾液アミラーゼ(液体)
- pH 指示薬ストリップ
- ストップウォッチまたはタイマー
- スポイト
- 安全ゴーグル
手順
1. 試験管の準備
一方を「コントロール」、もう一方を「酵素」とラベル付けする。
2. コントロールの設定
コントロール試験管にデンプン溶液 5 ml と水 5 ml を加え、軽く混ぜる。
3. 酵素試験管の設定
酵素試験管にデンプン溶液 5 ml と唾液アミラーゼ 5 ml を加え、同様に混ぜる。
4. インキュベーション
両試験管を 37℃ の水浴に入れ、温度を一定に保つ。
5. 時間間隔の設定
0 分(開始時)、5 分、10 分、15 分の計 4 回、試験管を取り出す。
6. デンプンの有無確認(ヨウ素テスト)
各時間で試験管から取り出し、希釈ヨウ素液を 2〜3 滴加える。デンプンが残っていれば青黒く変色する。
7. ブドウ糖の有無確認(ベネディクトテスト)
同様にベネディクト液を 5 滴加え、沸騰水浴で 2〜3 分加熱する。色が緑・黄・橙・赤へ変わるほどブドウ糖濃度が高い。
8. pH の測定
pH 指示薬ストリップで各試験管の pH を測定し、変化を記録する。
9. 観察結果の記録
各時間点での色変化と pH を表にまとめる。
10. 再現実験
データの信頼性を高めるため、実験を数回繰り返す。
予想結果
コントロール試験管:ヨウ素液は常に青黒く、ベネディクト液は青のまま。pH はほぼ変化しない。
酵素試験管:時間とともにヨウ素液の色が薄くなり、デンプンが分解される。ベネディクト液は緑→黄→橙→赤へと変化し、ブドウ糖生成を示す。pH は若干低下することがある。
結論
唾液アミラーゼがデンプンをブドウ糖に分解する過程を、ヨウ素試験とベネディクト試験、さらに pH 変化から可視化できた。酵素と基質の相互作用や、複合炭水化物が単糖に変わる原理を実感できる実験である。
