グルコースオキシダーゼの調製手順
グルコースオキシダーゼは、グルコース濃度を測定する分析に広く用いられる酵素です。安価で、乾燥状態でも溶液中でも安定し、取り扱いも安全なため、試薬として非常に人気があります。通常、数百回分の測定に対応できるアッセイキットとして提供され、必要な試薬が一式揃っています。
必要なもの
- ビーカー
- リン酸二水素カリウム（KH₂PO₄）
- 蒸留水
- 撹拌プレート
- pHメーター
- 1 M 水酸化カリウム溶液
- グルコースオキシダーゼ
- 試験管（任意）
調製手順
- 0.1 M リン酸緩衝液を作ります。KH₂PO₄を13.6 mg 秤取し、800 ml の蒸留水に溶解し、pHメーターでpH 7.0になるように1 M 水酸化カリウムで調整します。その後、全体量を1 L に調整します。
- 別のビーカーに蒸留水 1 ml に対してグルコースオキシダーゼ 10 mg を加え、泡立ちを防ぐために軽くシェイクしながら混合します。
- 作成した0.1 M リン酸緩衝液に、必要な濃度ごとにグルコースオキシダーゼ溶液を加えます。測定したい検出レベルと、線形回帰計算に使用する濃度点数に応じて、各濃度を計算してください。