ウエスタンブロット分析

自然であろうと人工的に発現するかどうかにかかわらず、タンパク質はほとんど単独では発見されません。ウエスタンブロット分析、または免疫ブロッティングは、混合物から目的のタンパク質を分離および分析するために使用されます。

1. 手順

   • <図>
     電圧の適用は、異なる速度でポリマージェルを介してタンパク質を引きます。

     ウエスタンブロッティングは、3つの主要なステップで構成されています。電気泳動では、タンパク質混合物がサイズと電荷に基づいて局所的なバンドに分離されます。タンパク質がポリマーゲルから紙基板に移動するトランスファー。および開発されたタンパク質バンドがラベル付けおよび分析されている開発。

   研究のアプリケーション

   • <図>
     ウエスタンブロットはセルタイプを決定するのに役立ちます。

     ウエスタンブロッティングは、生物医学研究で広く使用されています。タンパク質は細胞機能の重要な指標であるため、ウエスタンブロットは細胞の代謝と系統に関する情報を提供できます。組換えタンパク質の発現は、ウエスタンブロットを使用して検証および研究することもできます。

   医学の用途

   • <図>
     ウエスタンブロットは、一部のプリオン病の診断に役立ちます。

     ウエスタンブロットは労働集約的で時間がかかり、その臨床応用は限られています。しかし、それらは、ライム病、HIV、クルーツフェルド・ジャコブ病などのプリオン疾患を含むいくつかの疾患の診断に重要です。

   歴史

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     ポリマーゲルは免疫化学の良い基質ではないため、効率的な伝達は重要な進歩でした。

     ポリマーゲルにおけるタンパク質分離の最初の実証は1977年に公開されました。エレクトロブロッティングによるタンパク質の迅速かつ効率的な移動 - メソッドおよびの受容のために批判的です - 1979年に実証されました。

   命名

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     2010年の時点で、イースタンブロットはありませんでした。

     用語＆ldquo;ウエスタンブロット＆rdquo;やや手の込んだ科学者としゃれの一部です。 DNAを特徴付けるための類似の手順は、発明者であるジョージサザンにちなんでサザンブロットと呼ばれます。 RNAバージョンは普遍的にノーザンブロットとして知られており、おそらく必然的にタンパク質免疫ブロッティングはウエスタンブロッティングです。