ゲル電気泳動のサンプル準備手順
電気泳動分離は生化学で最も広く用いられる手法の一つです。溶液中で自由に電気泳動を行うこともできますが、紙やゲルなどの支持媒体を使用すると便利です。特にゲル電気泳動はタンパク質や核酸の解析に頻繁に用いられ、DNA解析は代表的な応用例です。DNAはポリ電解質であり、サイズだけで分離できます。
必要なもの
- サンプル溶液
- 既知分子量の標準溶液
- バッファー溶液
- ゲル媒体(ポリアクリルアミド、アガロース、または多糖類)
- トラッキング染料
手順
- サンプル溶液と既知分子量の標準溶液を用意します。
- サンプルと同じpHに近いバッファー溶液を調整します。
- ゲル(ポリアクリルアミド、アガロース、または多糖類)を作成し、支持媒体として用意します。
- ゲルを電極室の間に配置し、陰イオンか陽イオンかに応じて、底部をアノードまたはカソードに設定します。
- ピペットで各サンプル溶液をゲル上部にある事前に設けられたウェル(凹み)に慎重に滴下します。
- サンプルにグリセロールと水溶性トラッキング染料を加えます。グリセロールはサンプル溶液の密度を上げ、上部電極室のバッファーと混ざりにくくします。
