CFU（コロニー形成単位）プロトコル

コロニー形成単位（CFU）は、微生物の数を測定する指標です。顕微鏡観察のように死細胞と生細胞を区別しない方法とは異なり、CFUプロトコルは培養可能な生きた細胞のみをカウントできます。液体サンプルでは「CFU/mL」、固体サンプルでは「CFU/g」の単位が用いられ、バイオテクノロジー研究で広く利用されています。

CFU-MK アッセイ（急性血小板減少症）プロトコル

MK（巨核球）は骨髄で血小板を産生する細胞です。本プロトコルは血小板減少症の研究に使用されます。技術者はヒト臍帯血細胞、Iscove改良Dulbecco培地、ウシコラーゲン溶液、サイトカインを含む無血清培地、抗TNP抗体、抗GPIIb/IIIa抗体、抗マウスIgG、エバンスブルー染色液、Tris/NaCl緩衝液、ウシ血清アルブミンを用意し、CFU-MK アッセイを実施します。

コロニーアッセイ混合液プロトコル

技術者はヒト血漿、2-メルカプトエタノール、白血球条件培地、エリスロポエチン、Iscove改良Dulbecco培地をJeffrey W. Pollardの『Basic Cell Culture Protocols』に従って調製します。この溶液を検体細胞と混合し、メチルセルロースを添加した後、5% CO₂、加湿環境で14日間培養します。

CD34 細胞における CFU の移動プロトコル

CD34は特定の免疫細胞表面に発現する分化抗原で、細胞膜上の接着因子として機能します。CD34陽性細胞は組織間を移動する能力があります。本プロトコルでは、移動したCD34細胞を洗浄し、サイトカインを除去した後、遠心分離し、増殖因子を含む培地に再懸濁します。コロニーは2週間後にカウントします。