バッファーのプロトコルと代表的使用例

バッファーとは、少量の酸やアルカリを加えても pH が変化しにくい溶液のことです。研究室では、抗原リトリーバルや細胞培養、PCR などさまざまな実験でバッファーが使用されます。本稿では代表的なバッファープロトコルを紹介します。

クエン酸緩衝液による抗原リトリーバル

• 試薬としてクエン酸ナトリウムまたはクエン酸を使用し、スライド上の抗原を露出させます。まず水浴を 212°F（約 100°C）に加熱し、染色皿にクエン酸緩衝液を入れます。温度が上がったら組織スライドを浸し、40 分間インキュベートします。その後 PBS‑Tween 洗浄液で洗浄し、室温で 1 時間以上抗原と反応させます（出典：Rocky Tuan, Developmental Biology Protocols）。

リン酸緩衝食塩水（PBS）

• PBS は生物学的実験で広く用いられる緩衝液です。調製は次の成分を蒸留水に溶解して行います：ジナトリウムリン酸（Na2HPO4）、モノナトリウムリン酸（NaH2PO4）、塩化ナトリウム（NaCl）。pH を 7.4（中性ややアルカリ性）に調整します。

ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）バッファー

• PCR 用バッファーは主に塩化カリウム（KCl）、トリス（Tris‑HCl）、塩化マグネシウム（MgCl2）で構成されます。これらは酵素（DNA ポリメラーゼ）の活性を最適化し、増幅反応を安定させます。市販の PCR バッファーは濃度が異なる製品が多数あり、実験条件に合わせて選択します（出典：トレド大学微生物生態学研究室）。