ドットブロットプロトコル

ドットブロット、またはスロットブロットは、生体分子を含む混合物をドットとして直接塗布することにより、生体分子を検出するために使用する技術分子生物学者です。ヌクレオチドプローブまたは抗体は、生体分子を検出します。この方法は、特定の生体分子の有無の確認を提供し、生体分子のサイズに関する情報を提供しないため、他のテストが必要です。

1. サザンブロット

   • Southernブロッティングは、特定のDNA配列を検出するプロトコルです。プローブハイブリダイゼーションを通じて見られる断片の検出と、フィルター膜に化学的に分離されたDNAフラグメントの伝達を組み合わせます。サザンブロットは、ゲノム内のシーケンスまたは遺伝子コピーの数を決定します。このプロセスは、1975年に開発された英国の生物学者エドウィンサザンにちなんで名付けられました。

   ノーザンブロット

   • サンプル内のRNAを検出することにより、ノーザンブロッティング研究遺伝子発現。このプロトコルにより、その構造と機能に対するセルの制御を観察することができます。 ノーザンブロッティングは、細胞の発達段階および異常または病気の状態で特定の遺伝子発現を決定します。

     RNAサンプルをサイズで分離するノーザンブロッティングは、ターゲットシーケンス全体の一部を検出します。スタンフォード大学の科学者チームが1977年の方法を開発しました。

   ウエスタンブロット

   • タンパク質免疫ブロットとも呼ばれるウエスタンブロットは、組織サンプルの特定のタンパク質を検出します。ゲル電気泳動を使用します。これは、ポリペプチドの長さまたはタンパク質の構造によって、ネイティブまたは変性タンパク質を分離します。生物学者がタンパク質を膜に移した後、標的タンパク質に特異的な抗体を使用してそれらを検出します。

     ウエスタンブロッティングは、HIV、狂牛病、いくつかの形態のライム病、B型肝炎、ネコ科学の診断に使用されます。

   南西ブロッティング

   • Southwestern Blottingには、特定のプローブに結合する能力がありますが、DNA結合タンパク質の特定と特性評価が含まれます。このプロセスは、ゲル電気泳動を介して行われ、特定の細胞膜に伝達され、サザンブロットとウエスタンブロットのプロトコルを組み合わせています。